Knudson-medium for orkideer

Knudson-medium er et kunstig næringsmedium utviklet i 1946 av den amerikanske botanikeren Lewis Knudson for å spire orkidéfrø og fremme vekst under sterile forhold. Det er et av de mest brukte mediene for dyrking av orkideer in vitro og er populært for både laboratorie- og hjemmebruk.

Hva er Knudson-mediumet?

Orkideer vokser naturlig i symbiose med mykorrhizasopper, som gir essensielle næringsstoffer. Det er imidlertid umulig å reprodusere denne symbiosen i laboratorieforhold. Knudson-medium ble utviklet som en næringsrik erstatning som gir alle de essensielle elementene som trengs for frøspiring og frøplantevekst.

Sammensetningen av Knudson-medium

Standardformelen inkluderer:

• Sukker: en primær energikilde.
• Mineralsalter:
  • Kaliumnitrat (kno₃) – en nitrogenkilde.
  • Magnesiumsulfat (mgso₄) – gir magnesium og svovel.
  • Kaliumdihydrogenfosfat (kh₂po₄) – forsyner fosfor og kalium.
  • Kalsiumklorid (cacl₂) – en kalsiumkilde.
• Vitaminer:
  • Nikotinsyre, tiamin og pyridoksin for å aktivere metabolske prosesser.
  • Jern, sink, mangan og andre elementer som er essensielle for vevsutvikling.
  • Agar-agar for å lage et fast medium som hindrer frø eller frøplanter i å synke ned.
• Sporstoffer:
• Geleringsmidler:

Fordeler med å bruke Knudson-medium

1. Stimulerer frøspiring:
   • Gir alle nødvendige næringsstoffer for spiring, og erstatter behovet for soppsymbiose.
2. Sterilt miljø:
   • Skaper ideelle vekstforhold uten risiko for bakteriell eller soppinfeksjon.
3. Optimale vekstforhold:
   • Støtter utviklingen av frøplanter inntil de er klare for omplanting i et substrat.
4. Passer for forskjellige orkidearter:
   • Formelen kan justeres for å møte de spesifikke behovene til ulike orkidetyper.

Anvendelser av Knudson-medium

1. Frøspiring:
   • Orkidéfrø steriliseres (vanligvis med natriumhypoklorittløsning).
   • Sterile frø plasseres på overflaten av næringsmediet i petriskåler eller reagensrør.
2. Frøplantevekst:
   • Mediet støtter frøplanteutvikling inntil blader og første rotsystemer dukker opp.
3. Transplantasjon til substrat:
   • Når frøplantene når en passende størrelse, blir de transplantert til et passende substrat (f.eks. bark, sphagnummose).

Hvordan tilberede Knudson-medium?

Ingredienser (eksempel for 1 liter):

• Agar-agar: 10 g
• Sukker: 20 g
• Kh₂po₄: 250 mg
• Mgso₄·7t₂o: 250 mg
• Kalsium₂·2t₂o: 250 mg
• Kno₃: 500 mg
• Vitaminer (tiamin, nikotinsyre): 1 mg hver
• Mikroelementer (f.eks. feso₄): 1–2 mg
• Destillert vann: 1 l

Trinn:

1. Løs opp alle komponentene i destillert vann.
2. Tilsett agar-agar og varm opp til den er helt oppløst.
3. Hell løsningen i sterile beholdere (petriskåler, reagensrør).
4. Steriliser mediet i en autoklav eller et vannbad (15 minutter ved 121 °C).
5. Avkjøl mediet slik at det kan stivne.

Tips for bruk av Knudson-medium

1. Oppretthold sterilitet:
   • Arbeid under sterile forhold for å forhindre kontaminering.
2. Overvåk temperatur:
   • Oppbevar kulturene ved +20–25 °C.
3. Sørg for tilstrekkelig lys:
   • Sørg for myk, diffus belysning i 12–14 timer daglig.
4. Transplantasjon:
   • Overfør frøplantene til et substrat når de er store nok til uavhengig vekst.

Konklusjon

Knudson-medium er et viktig verktøy for å spire orkidéfrø og dyrke sunne frøplanter. Det gir den perfekte balansen av næringsstoffer for vekst, og eliminerer behovet for soppsymbiose. Dette mediet er ideelt for formering av sjeldne og dekorative orkidéarter, enten i et laboratorium eller hjemme.